Медицина

Методические указания

 

Методические указания

к практическим занятиям для студентов стоматологического факультета.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 8 (практическое - 6 час.)

Темы:

1. Молекулярно-клеточные механизмы действия гормонов пептидно-белковой природы на клетки-мишени.

2. Молекулярно-клеточные механизмы действия катехоламинов и других биогенных аминов.

 

Цель: Уметь использовать знания о химическом строении и функциях гормонов гипофиза, поджелудочной железы, катехоламинов и других биогенных аминов для объяснения регуляции обмена веществ в норме и при патологии.

 

Профессиональная ориентация студентов: Гормоны являются промежуточным звеном в регуляции биохимических процессов в клетках. Знание их строения, молекулярно-клеточных механизмов действия является основой для понимания патогенеза эндокринных болезней (сахарны, несахарный диабет, акромегалия, адреналовый синдром и др.), а также использования гормональных препаратов, биогенных аминов с лечебной целью. 

 

Методика выполнения практической работы:- 9.00-12.00.

Выполнение практической работы проходит согласно с “Методическими указаниями для студентов” с обязательным выводом в конце каждой работы.

I  Молекулярно-клеточные механизмы действия гормонов пептидно-белковой природы на клетки - мишени.

Работа 1. Качественные реакции на гормоны гипофиза и инсулин.

Гормоны гипофиза и инсулин относятся к группе гормонов белково-пептидной природы, для их выявления используют биуретовую реакцию.

Принцип метода. Соединения, имеющие пептидные связи, образуют в щелочной среде с ионами меди комплексные соли розово-фиолетового цвета.

Техника работы.

В первую пробирку вносят 5-6 капель раствора гормонов гипофиза, во вторую – 5-6 капель раствора инсулина. В обе пробирки добавляют по 5-6 капель 10 % NaOH и по 2 капли 1 % CuSO4. Перемешивают и отмечают цвет раствора. Делают вывод о химической природе гормонов гипофиза и инсулина.

 

II Молекулярно-клеточные механизмы действия катехоламинов и других биогенных аминов.

Работа 2. Качественные реакции и определение содержания адреналина в тканевой вытяжке методом Фолина.

Принцип метода. Реакции выявления адреналина основаны на его способности легко окисляться с образованием окрашенных продуктов благодаря наличию в его составе пирокатехинового кольца.

Техника работы.

А) Реакция с FeCl3.

В пробирку вносят 10 капель раствора адреналина и добавляют 1 каплю FeCl3. Наблюдают зелёное окрашивание раствора. Добавляют 3 капли 10 % NaOH и наблюдают появление вишнёво-красного окрашивания.

Б) Диазореакция.

К 6 каплям 0,5 % раствора сульфаниловой кислоты добавляют 6 капель 0,5 % раствора нитрата натрия (смесь диазореактива), 10 капель раствора адреналина и 3 капли 1 % NaOH. Наблюдают появление красного окрашивания.

Количественное определение адреналина в тканевой вытяжке методом Фолина.

Принцип метода. Метод основан на свойстве адреналина восстанавливать фосфорно-вольфрамовую и фосфорно-молибденовую смесь (реактив Фолина) с образованием комплексов, окрашенных в синий цвет, интенсивность которого определяется колориметрией.

Ход работы.

Берут 2 пробирки. В 1-ю вносят 1 мл тканевой вытяжки, во 2-ю – 1 мл стандартного раствора адреналина (0,025 мг/1 мл), в обе пробирки добавляют по 4 мл 10 % Na2CO3 и по 0,5 мл реактива Фолина. Наблюдают появление синего цвета растворов. Через 5 мин. пробы колориметрируют на ФЕКе при красном светофильтре против воды в кюветах 5 мл. Расчёт по формуле:

                ЭОП × ССТ

С ОП =--------------------    , где:

                    ЭСТ

Соп – концентрация адреналина в тканевой вытяжке (в мг/1 мл);

Эоп и Эст – экстинкции опыта и стандарта;

Сст – концентрация стандартного раствора.

Сформулировать вывод, исходя из того, что в спокойном состоянии содержание адреналина в тканях не превышает 0,025 мг/1 мл трихлоруксусной вытяжки.

 

Программа самоподготовки студентов к занятию

I Молекулярно-клеточные механизмы действия гормонов пептидно-белковой природы на клетки-мишени.

1. Основные принципы нейрогуморальной регуляции обмена веществ.

2. Железы внутренней секреции. Классификация гормонов.

3. Общие механизмы влияния гормонов на обмен веществ:

а) рецепторы гормонов;

б) вторичные посредники влияния гормонов на клетку;

в) влияние на генетический аппарат клетки;

г) механизм обратной связи в гормональной регуляции.

4. Гормоны гипоталамуса, их природа и механизм влияния на гипофиз; либерины и статины.

5. Гормоны гипофиза, строение, влияние на обмен веществ.

6. Гормоны поджелудочной железы:

а) строение инсулина, глюкагона и соматостатина;

б) влияние инсулина на обмен веществ: действие на ключевые реакции метаболизма;

в) механизм действия глюкагона, отличие от адреналина;

г) влияние соматостатина на секрецию инсулина и глюкагона.

7. Проявления гипо- и гиперфункции гипофиза и поджелудочной железы.

8. Качественные реакции на гормоны гипофиза и поджелудочной железы.

II Молекулярно-клеточные механизмы действия катехоламинов и других биогенных аминов.

1. Гормоны мозгового слоя надпочечников:

а) катехоламины (адреналин, норадреналин, дофамин):  строение,  биосинтез;

б) влияние на обмен веществ гормонов мозгового слоя надпочечников, гипо- и гиперфункция.

2. Тканевые гормоны:

а) представители, химическая природа, локализация;

б) влияние на обмен веществ.

3. Методы качественного и количественного определения адреналина в биологических жидкостях.

 

Семинарское обсуждение теоретических вопросов: 12.30-14.00

 

Образцы тестовых заданий и ситуационных задач

1. Человек находится в состоянии стресса. Как это отразится на функции желез эндокринной системы?

2. У больного наблюдается постоянно значительная полиурия. Патологические компоненты в моче не обнаружены. О чем это может свидетельствовать?

3. Известно, что адреналин активирует липолиз, а простагландин Е1 его подавляет. Оба гормона связываются со специфическими рецепторами на поверхности адипоцитов и действуют через аденилатциклазу. Эффект действия обоих гормонов зависит от внутриклеточного фосфорилирования белков. Какие специфические звенья в последовательном цепном механизме действия данных гормонов определяют их разный конечный эффект?

А. Белки-трансдукторы Gs и .

В. Аденилатциклаза, специфическая для каждого гормона

С. ц-АМФ, специфический для каждого гормона

Д. Протеинкиназа, специфическая для каждого гормона

Е. Фосфорилаза, специфическая для каждого гормона

4. Ребенку 7 лет с гипофункцией гипофиза проведено лечение соматотропином (СТГ). Как влияет передозировка гормона на состояние углеводного обмена?:

А. Активация гликогенолиза

В. Активация глюконеогенеза

С. Активация синтеза гликогена

Д. Активация анаэробного гликолиза

Е. Активация пентозофосфатного шунта

 

Cамостоятельная работа студентов: 14.15 – 15.00 час.

Студент должен знать:

1. Механизм нейрогуморальной регуляции обмена веществ.

2. Химическую природу и механизм действия гормонов гипоталамуса, гипофиза, поджелудочной железы.

3. Симптомы гипер- и гипофункции гипофиза и поджелудочной железы.

4. Строение и влияние на обмен веществ катехоламинов и других биогенных аминов.

 

Студент должен уметь:

1. Выполнить качественные реакции на гормоны гипофиза, инсулин и адреналин.

2. Определить содержание адреналина в биологических жидкостях.

3. Объяснить механизм действия гормонов гипофиза, инсулина, катехоламинов на обмен веществ в норме и патологии.

4. Объяснить развитие эндокринных нарушений при гипо- и гиперфункии гипофиза, поджелудочной железы, надпочечников, их профилактику и лечение.

 

Эталоны ответов на тесты и ситуационные задачи:

1.  В стрессовой ситуации в крови повышается содержание адреналина, АКТГ, глюкокортикоидов.

2.  О недостаточном синтезе вазопрессина.

3. А

4. А

 

Источники информации:

Основные:

1. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1990. – С. 63-64, 170-182, 186-191, 347-348.

2. Савицкий И.В. Биологическая химия - К.: Высшая школа, 1982. – С.334-340, 344-351, 360-366.

3. Конспекты лекций.

4.  Веб-страница университета > Материалы для подготовки к практическим занятиям.

5. Веб-страница университета > Презентации лекций.

Дополнительные:

1.     Николаев А.Я. Биологическая химия. - М: Высшая школа, 1989. - 496 с.

2.     Ленинджер А. Основы биохимии: Перевод с англ. - М.: Мир, 1985. - 1024 с.

 

 

Методическое указание составила доц. Яворская С.И.

 

 

Обсуждено и утверждено на заседании кафедры

«11» июня  2013 г. протокол № 13

Пересмотрено и утверждено на заседании кафедры

«29» августа   2013 г. протокол №  2